Правила работы с биологическими приборами и инструментами. Рекомендации по технике безопасности и охране труда в биологической лаборатории. Требования безопасности во время занятий

В экскрементах, носоглоточных выделениях, мокроте, моче и рвотных массах концентрация ВИЧ очень низкая или ВИЧ не обнаруживается. Однако соблюдать меры предосторожности необходимо, т.к. это позволит предотвратить передачу от пациентов других инфекционных агентов.

Меры предосторожности:

1. Избегайте непосредственного контакта с биологическими жидкостями. Работайте только в перчатках. Не допускайте боя лабораторной посуды и травм осколками стекла.

2. Обеззараживайте выделения пациентов перед сливом в канализацию.

3. Тщательно дезинфицируйте лабораторную посуду, судна, мочеприемники, петли для забора кала и т.д.

Приложение

к Инструкции по технике выполнения

лечебных и диагностических процедур и манипуляций по дисциплинам

«Сестринское дело в терапии»,

«Терапия» по специальностям

2-79 01 31 «Сестринское дело»

2-79 01 01 «Лечебное дело»

Взятие крови из вены ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ НА ВИЧ-ИНФЕКЦИЮ.

Места пункции: 1) поверхностные вены локтевого сгиба, предплечья, кисти.

Показания: 1) диагностические исследования.

Общие сведения. Основным методом лабораторной диагностики является обнаружение АТ к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). В лабораторию доставляется сыворотка или кровь. Кровь может храниться в холодильнике не более суток. Если в эти сроки доставка невозможна, то через полчаса-час после взятия крови необходимо слить сыворотку, которая может храниться в холодильнике до 3-х суток. Пробы доставляются в пробирках, закрытых пробками, в контейнере, исключающим выливание. На дне контейнера должна находиться сухая ветошь для впитывания крови в случае аварии.

Оснащение рабочего места:

№ п/п	При использовании стерильного материала из бязевой упаковки	При использовании индивидуальных, разовых крафт-упаковок со стерильным материалом
	Средства индивидуальной защиты а) фартук б) нарукавники в) перчатки г) очки (защитный экран) д) маска	использовать
	Манипуляционный стол	использовать
	Продезинфицированная ветошь	использовать
	Ёмкости с дез. растворами, промаркированные и закрытые крышками: а) для обработки поверхностей б) для использованной ветоши в) для промывания шприцов и игл г) ёмкость (контейнер) для замачивания использованных игл и пинцет для их снятия д) контейнер для замачивания использованных шприцов е) ёмкость (контейнер) для обеззараживания использованных шариков ж) ёмкость для замачивания перчаток	использовать
	Продезинфицированный лоток	использовать
	Стерильная ёмкость для стерильного материала	исключить
	Стерильная чашка Петри	исключить
	Стерильная ёмкость из тёмного стекла	исключить
	6% раствор перекиси водорода	исключить
	Стерильный пинцет	исключить
	Бикс со стерильным материалом	исключить
	Антисептик	использовать
	Штатив для пробирок	использовать
	Пробирки с резиновыми пробками	использовать
	Стерильный шприц емкость 10,0 мл.	использовать
	Стерильные иглы с сечением 0,8, длиной 40 мм	использовать
	Жгут, подушечка, салфетка	использовать
	Бирки	использовать
	Контейнер для транспортировки крови	использовать

Подготовительный этап выполнения манипуляции.

1. Объяснить больному цель и ход исследования и получить согласие.

2. Накануне дня исследования осведомить больного, что процедура проводится утром натощак.

3. В процедурном кабинете - внести данные о больном в журнал

регистрации. (ф. 029/у).

3. Оформить направление; порядковый номер из журнала записать на направлении и нанести маркером на пробирку.

4. Снять все предметы с рук (кольца, часы).

5. Провести гигиеническую антисептику рук, надеть

Нарукавники;

Перчатки;

6. Подготовить манипуляционный столик к работе.

7. Проверить срок годности шприца и герметичность упаковки.

8. Вскрыть упаковку, собрать шприц.

9. Проверить проходимость иглы, не снимая колпачка.

10. Подготовленный шприц поместить внутрь упаковки.

11. Усадить или уложить больного, подложить под локоть клеенчатую подушечку.

12. Наложить жгут на 10-12 см выше предполагаемого места пункции поверх салфетки или рубашки так, чтобы свободные концы жгута были направлены вверх.

13. Проверить наличие пульса на лучевой артерии. Сделать массирующие движения ребром ладони по направлению к локтевому сгибу, предложив больному поработать «кулачком». Пальпировать вену при сжатом кулаке.

14. Обработать руки в перчатках антисептиком.

15. Стерильным пинцетом взять 3 стерильных шарика и смочить антисептиком. Обработать двумя шариками пункционное поле (1-ым широко, 2-ым узко), 3-ий шарик положить на место предполагаемой пункции.

Основной этап выполнения манипуляции.

16. Взять шприц в правую руку, а левой захватить шарик с предполагаемого места пункции и поместить его между 4 и 5 пальцами кисти.

17. Большим пальцем левой руки зафиксировать вену.

18. Пунктировать вену и набрать в шприц 3-5 мл крови.

19. Развязать жгут. Попросить больного разжать кулак, положить на место пункции шарик и быстрым движением выйти из вены.

20. Согнуть руку больного в локтевом суставе на 3-5 минут.

21. Медленно выпустить кровь из шприца по краю пробирки и закрыть её пробкой.

22. При необходимости положить на место пункции сухой стерильный шарик или давящую повязку.

23.Медленно выпустить кровь из шприца по краю пробирки. Закрыть пробирку пробкой.

Заключительный этап выполнения манипуляции.

24. Для обеззараживания шприца и иглы использовать 3 емкости: в 1-ой промыть шприц с иглой, во 2-ой - заполнить иглу дез.раствором, снять ее отдельным пинцетом и погрузить в эту же емкость (контейнер) на время, согласно инструкции по применению дез. средства.

25.Шприц в разобранном виде поместить в контейнер (емкость №3) для дезинфекции инструментов медназначения. Экспозицию отсчитывать с момента выполнения последней манипуляции.

26. Обработать дезинфектантом подушечку, жгут, фартук, нарукавники, манипуляционный стол, кушетку и другие рабочие поверхности.

27. Снять шарик с руки больного, в случае необходимости положить сухой стерильный шарик или наложить давящую повязку

28. Использованные шарики замочить в контейнер соответствующей маркировки.

29. Штатив с пробирками поместить в контейнер

30. Руки помыть под проточной водой с мылом.

31.Уложить направление в полиэтиленовый пакет.

32. Контейнер и отдельно полиэтиленовый пакет с направлениями доставить в лабораторию.

33. Снять с себя маску, очки, нарукавники, передник, перчатки. Перчатки замочить в дез.раствор согласно инструкции.

Примечание:

При работе со стерильными материалами из индивидуальной крафт - упаковки шарики и салфетки брать рукой.

Возможные осложнения: 1) образование гематомы (кровоизлияние под кожу) при неумелой пункции вены; 2) тромбофлебит, флебит (воспаление вены с образованием тромба или без него) при нарушении правил асептики; 3) сепсис (общее инфекционное заболевание) при грубейших нарушениях правил асептики; 4) воздушная эмболия при нарушении техники введения лекарственного вещества.

Г. Пинск

Медицинская документация

Форма № 264/У-88

Утв. МЗ СССР 05.09.88 г. № 690

НАПРАВЛЕНИЕ №

На исследование образцов крови на ИФА на СПИД в

(наименование учреждения)

Должность, фамилия, подпись лица, направляющего материал. Дата-------200 год

Коды контингента:

Наркоманы.

Больные вензаболеваниями.

Доноры.

Беременные.

Реципиенты препаратов крови.

Лица, находящиеся в местах лишения свободы.

Обследованные по клиническим показаниям.

Обследованные анонимно,

Бытовые и медицинские контакты с больными СПИД или с серопозитивными.

Дети.

АЛГОРИТМ действий медицинского персонала при ранениях, контактах с кровью, другимибиологическими материалами пациентов Составлен на основании приложения №5 к приказу МЗ РБ № 351 от 16.12.98г.

1. Если контакт с кровью или другими биологическими жидкостями произошел с нарушением целостности кожных покровов, то пострадавший должен:

При уколе

1.1.1. Снять перчатки рабочей поверхностью внутрь.

1.1.2. Выдавить кровь из раны.

1.1.3. Обработать поврежденное место 3% раствором перекиси водорода

1.1.4. Вымыть руки под проточной водой с мылом

1.1.5. Протереть руки одним из имеющихся антисептиков. 70% спиртом, 5% йодной настойкой.

1.1.6. Наложить на рану пластырь, надеть напальчник.

1.1.7. При необходимости продолжить работу, надеть новые перчатки.

1.2. При порезе :

1.2.1. Снять перчатки рабочей поверхностью внутрь.

1.2.2. Выдавить кровь из раны.

1.2.3. Обработать поврежденное место одним из дезинфектантов (70% спирт. 5% настойка йода).

1.2.4. Вымыть руки под проточной водой с мылом.

1.2.5. Протереть руки 70% спиртом.

1.2.6. Наложить на рану пластырь, надеть напальчник.

1.2.7. При необходимости продолжить работу, надеть новые перчатки.

2. Если контакт с кровью илн другими биологическими жидкостями произошел без повреждения целостности кожных покровов, то пострадавший должен:

2.1. Обработать кожу одним из дезинфектантов (70% спирт: 3% перекись водорода; другой имеющийся в наличии антисептик).

2.2. Вымыть проточной водой с мылом обработанное место и повторно обработать его 70% спиртом.

3. Если биологический материал попал на слизистые оболочки, то пострадавший должен:

3.1. Полость рта:

3.1.1. Прополоскать 70% спиртом

3.2. Полость носа:

3.2.1, Закапать 20-30% раствором альбуцида.

Глаза

3.3.1. Промыть проточной водой (чистыми руками).

3.3.2. Закапать 20-30% раствором альбуцида

4. Если биологический материал попал на халат, одежду, обувь, то пострадавший должен:

В связи с ростом заболеваемости ВИЧ-инфекцией и парентеральными гепатитами В и С увеличивается риск инфицирования медицинских работников во время проведения манипуляций в лечебно-профилактических учреждениях.

Заражение медработника чаще всего проходит при загрязнении кожи и слизистых биологическими жидкостями больного (кровь, сыворотка, ликвор, сперма и др.) и травматизации их во время выполнения медицинских манипуляций (порез, укол, повреждение кожи мелкими отломками кости и др.). Риску профессионального инфицирования больше, всего подвергаются медицинские работники, соприкасающиеся с кровью и ее компонентами. В первую очередь, это сотрудники гематологических, реанимационных, стоматологических, гинекологических, хирургических отделений и отделений гемодиализа, процедурных кабинетов, лабораторий, а также на производстве по заготовке крови, ее компонентов и препаратов.

Учитывая возможную инфицированность крови и биологического материала человека вирусами СПИДа, гепатитов, цитомегаловирусами, рядом онкогенных вирусов, правила профилактики профессионального заражения распространяются на все лечебно-профилактические учреждения независимо от профиля. Эти правила сводятся к максимальному предотвращению возможности загрязнения кожи и слизистых.

Всех пациентов необходимо рассматривать как потенциально инфицированных ВИЧ и другими передаваемыми с кровью инфекциями.

Медицинскому персоналу следует выполнять правила безопасности для защиты кожи и слизистых оболочек при контакте с кровью или жидкими выделениями организма любого пациента:

1. Мыть руки до и после любого контакта с пациентом.

2. При осуществлении манипуляций надевать халат, шапочку, сменную обувь, выходить в которых за пределы лаборатории, отделения запрещается.

3. При выполнении парентеральных манипуляций все имеющиеся на руках повреждения кожи должны быть закрыты напальчниками или лейкопластырем.

4. Рассматривать кровь и жидкие выделения всех пациентов как потенциально инфицированные и работать с ними только в перчатках, которые единожды снятые повторно не используются.

5. Сразу после применения медицинский инструментарии помещать в дезинфицирующий раствор, шприцы и катетеры в специальный контейнер для утилизации острых предметов. Никогда не снимать со шприцев иглодержатели с иглами и не производить никаких манипуляций с использованными иглами.

6. Для предотвращения возможного попадания брызг крови и других биологических жидкостей необходимо пользоваться средствами защиты глаз и лица (маска, очки, щитки-экраны и др.)

7. Рассматривать все белье, запачканное кровью или жидкими выделениями, все образцы лабораторных анализов как потенциально инфицированные.

8. Для дезинфекции применять 3 % и 5 % раствор хлорамина (хлорной извести), 6 % раствор перекиси водорода, 70 0 этиловый спирт.

Все рабочие места, где возможно загрязнение кожных и слизистых покровов медицинских работников кровью и другими биологическими жидкостями, должны быть оснащены аптечкой первой медицинской помощи при аварийных ситуациях.

Аптечка должна храниться в легкодоступном для персонала месте. Необходимо следить за сроком годности входящих в перечень средств. Контроль за готовностью аптечки к работе возлагается на старшую медицинскую сестру структурного подразделения. Все рабочие места должны быть оснащены необходимым количеством дезинфицирующих и моющих средств.

При попадании крови и других биологических жидкостей на спецодежду место загрязнения обработать 3 % или 5 % раствором хлорамина, или 6 % раствором перекиси водорода. Затем обработать перчатки, снять халат, свернуть и сдать для проведения полной дезинфекции. При загрязнении рук кровью или попадании ее на лицо следует немедленно обработать тампоном, смоченным 1 % раствором хлорамина или 70 0 этиловым спиртом, вымыть 2-кратно теплой проточной водой с мылом и насухо вытереть индивидуальным полотенцем.

В аварийных ситуациях, связанных с реальной опасностью зараже­ния в стационарах, микробиологических лабораториях,показана экст­ренная профилактика (превентивное лечение) антибиотиками или химио-препаратами. Ее назначают при особо опасных инфекциях (чума, хо­лера), ВИЧ-инфекции. В зависимости от степени риска парентерального заражения ВИЧ-инфекцией рекомендуется комбинация 3 препаратов или одного азидотимидина в течение 4 недель.

Важно начинать экстренную профилактику в первые 24 часа пос­ле заражения!

Во время вспышки гриппа и других ОРЗ с целью экстренной профи­лактики показано назначение иммуномодуляторов (иммуностимуляторов) - дибазола, арбидола, а также препаратов, оказывающих вирулицидное действие (ремантадин и др.).

Иммунокорректоры показаны и вне сложных эпидемиологических си­туаций медицинским работникам с иммунодефицитами.

Основные направления разработки программы профилактики внутрибольничной инфекции (ВБИ) у медицинского персонала:

Скрининг медицинского персонала на наличие инфекции:

При приеме на работу,

В плановом порядке,

По эпидемиологическим показаниям.

Разработка критериев:

Приема на работу,

Отстранения от работы,

Ограничения профессиональной деятельности.

Определение профессиональных факторов риска и групп риска в каждом стационаре.

Разработка стандартной технологии выполнения лечебных и диагно­стических процедур.

Вакцинация медицинского персонала.

Организация диспансерного обследования медицинского персона­ла:

Выявление и учет заболеваний на основе определения стандартно­го случая ВБИ,

Определение критериев профессиональных заражений ВБИ,

Лечение профессиональных и непрофессиональных инфекционных заболеваний,

Создание базы данных о заболеваемости персонала и проведен­ных мероприятиях.

Определение обязанностей администрации больницы и необходи­мых ресурсов.

Обучение персонала разных типов ЛПУ:

Среднего звена,

Младшего персонала.

В целях предупреждения инфицирования мед. персонала необходимо рассматривать всех пациентов как потенциально инфицированных парентеральным гепатитам и ВИЧ – инфекцией или другими переносимыми с кровью и биологической жидкостью вирусными заболеваниями, и следует строжайшим образом соблюдать меры предосторожности.

1. Избегать случайных травм инструментами, инфицированными потенциально зараженным материалом и контакта открытых поражений кожи с биологическими материалами: кровью, спермой, вагинальными выделениями, спинно – мозговой жидкостью, синовиальной, плевральной, брюшной, перикардиальной, околоплодной жидкостью. Концентрация вируса низка или не обнаруживается в выделениях носовой полости, слюне слезах, рвотных массах, моче.

• Не сгибайте, не ломайте иглы после их использования и не надевайте на них колпачки до обработки.
• Колющие и режущие предметы не передавать из рук в руки, а класть в нейтральную зону.
• Обработку острых предметов и игл проводить отдельно от других инструментов.
• Обработку острых, режущих инструментов и игл проводить в перчатках.
• Одноразовые режущие- и колющие предметы после дезинфекции складывать в непрокалываемые контейнеры, сделанные из плотного картона, пластмассы или металла, которые впоследствии утилизуются или идут в переработку.

2. При работе с образцами крови, жидкостями, экскрементами и секретами организма пациентов, а также с материалами и объектами, подвергающиеся загрязнению ими, пользоваться перчатками и желательно менять их после каждого пациента, использовать только целые перчатки из латекса достаточной толщины.

3. Не забывайте тщательно мыть руки и кожу сразу после контакта с жидкостями организма, а также перед и после выполнения манипуляции. Руки должны быть тщательно вымыты, даже если до этого были одеты перчатки. Забор крови проводить одноразовыми шприцами,

4. Пользуйтесь спец. одеждой – халатом, колпаком, маской, очками, водонепроницаемым фартуком и др.

5. Кровь и другие биологические жидкости должны иметь специальную маркировку, при транспортировке все образцы должны быть помещены во второй контейнер или герметичную сумку (спец. контейнер).

6. Необходимо соблюдать максимальную осторожность при заборе крови, при работе с пробирками, заполненными кровью. Не допускать разбрызгивания крови. При разбрызгивании крови следует быстро очистить загрязненную поверхность дезинфицирующим раствором (ОСТ 42-21- 2-85).

7. Шприцы, иглы, колющий и режущий инструментарий многоразового использования обрабатывается по ОСТу 42-21-2-85 и приказу № 408.

8. Важно ограничить инъекции и другие чрезкожные процедуры, сокращение числа ненужных инъекций является важным мероприятием для защиты как медицинских работников, так и пациентов.

9. Использованные тампоны с кровью, иглы, шприцы и другой инструментарий погружать в 3 % раствор хлорамина на 1 час или 6 % перекись водорода на 6 часов, одноразовый инструментарий в 5% раствор хлорамина.

10 . Неукоснительно соблюдать режим дезинфекции, предстерилизационной очистки, стерилизации!

11 . Соблюдать бельевой режим – белье менять по мере загрязнения, регулярно, но не менее 1 раза в 7 дней, Загрязненное белье пациента подлежит немедленной замене.

Смотрите также:

ОСНАЩЕНИЕ: Маркированный инвентарь 2 ведра («Дезинфицирующее средство» и «Вода») швабра («Процедурный кабинет») кастрюли или контейнеры, ветошь (для различных предметов отдельная!) дезинфицирующее средство (р-р хлорамина). АЛГОРИТМ Проводится не реже 2-х раз в день влажным способом с применением 3% р-ра хлорамина или 3% р-р перекиси водорода + 0,5% моющее средство. Обработать вертикальные и горизонтальные поверхности...

ПОКАЗАНИЯ: отсутствие возможности или наличие противопоказаний для приема лекарственных средств внутрь и парентерально; местное воздействие на воспалительные процессы в толстой кишке; судороги; резкое возбуждение. ОСНАЩЕНИЕ: Стерильные: резиновый баллончик; лотки; газоотводная трубка; шпателя; емкости для шпателей; перчатки маска; клеенчатый фартук; дополнительный промаркированный халат "Для клизм"; пеленка; вазелин; клеенка; фантом...

Цели: Краткосрочная: пациент продемонстрирует знания о способах улучшения сна через 2 дня. Долгосрочная: пациент отметит улучшение сна к концу недели. Характер сестринских вмешательств: Медсестра проведёт беседы с пациентом о способах улучшения сна по 10 минут ежедневно в течении 3-х дней. Медсестра обеспечит чистоту, тишину, и свежий воздух в палате (температура воздуха в палате 18-20). Медсестра будет следить за соблюдением...

При работе с патологическим материалом, содержащим микробы, и особенно при культивировании патогенных мик­робов во избежание заражения персонала лаборатории необхо­димо соблюдать правила техники биологической безопасности. В зависимости от степени патогенности и контагиозности воз­будителей принято выделять четыре уровня биологической опасности и соответствующих мероприятий, необходимых для предупреждения заражения в лаборатории.

Первый уровень (работа с непатогенными микроорганиз­мами). Необходимо соблюдение стандартных правил (см. тему 1.1).

Второй уровень (работа с низковирулентными микроорга­низмами). К числу дополнительных правил и мероприятий относятся использование лабораторной одежды и защитных перчаток; обязательное обеззараживание всех загрязненных от­ходов; ограничение доступа в лабораторию. Для предотвраще­ния попадания микробов в воздух рабочего помещения выпол­нение механических манипуляций, сопряженных с высокой вероятностью распыления микроорганизмов, необходимо осу­ществлять в специализированных закрытых легкодезинфици-руемых настольных боксах.

Третий уровень (работа с высоковирулентными микроорга­низмами). К числу дополнительных правил и мероприятий относятся использование специальной защитной лабораторной одежды; контроль доступа в лабораторию. Все манипуляции с патологическим материалом необходимо осуществлять в спе­циализированных боксах.

Четвертый уровень (работа с возбудителями ООИ). Работа с возбудителями особо опасных инфекций (ООИ) разрешена ис­ключительно в специализированных режимных лабораториях,

Имеющих оборудование, необходимое для эффективной защи­ты от патогенных микробов, их контроля и уничтожения. К числу дополнительных правил и мероприятий относятся наличие отдельных помещений для смены лабораторной одеж­ды и душевых, обязательное обеззараживание всех отходов лаборатории. Все манипуляции с патологическим материа­лом необходимо осуществлять в специализированных на­стольных боксах, снабженных системами стерилизации возду­ха (см. тему 7.1).

■ ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Обнаружение патогенных микроорганизмов, являющихся возбудителями заболеваний (например, микобактерии туберку­леза, гонококки и др.), имеет решающее значение для поста­новки диагноза.

Выявление роли условно-патогенных микроорганизмов в этиологии и патогенезе заболеваний должно быть основано на строгой аргументации. Обязательным условием является кли­ническое, эпидемиологическое, микробиологическое и сероло­гическое исключение возбудителей инфекционных болезней (например, возбудителей кишечных инфекций, венерических болезней и др.). Для оценки роли условно-патогенных микро­организмов в патологии могут быть использованы следующие критерии.

1. Выделение микроорганизмов из крови, спинномозговой жидкости или других жидкостей организма, которые в норме у здоровых людей являются стерильными.

2. Обнаружение в исследуемом материале, особенно при дисбактериозах, условно-патогенных микроорганизмов в до­статочно больших количествах (например, 10 5 -10 7 микробных клеток в 1 мл). Для этого проводят количественное определе­ние микроорганизмов по числу КОЕ в 1 г или 1 мл испытуе­мого образца. Эти количественные показатели могут варьиро­вать в зависимости от вида микроорганизмов, типа исследуе­мого материала, характера и стадии заболевания.

3. Повторное, многократное (в течение суток или через сутки) выделение одного и того же микроорганизма из одного и того же материала от больного (например, из крови при сепсисе и т.д.).

4. Обнаружение идентичных условно-патогенных микроор­ганизмов в разных образцах материала (например, при пище­вых токсикоинфекциях - в промывных водах желудка, рвот­ных массах, испражнениях, пищевых продуктах).

5. Нарастание титра антител в 4 раза и более в парных сыворотках крови больного в отношении условно-патогенного микроорганизма, который предполагается как возбудитель дан-

ного патологического процесса. В ряде случаев рекомендуется использовать в качестве антигенов аутоштаммы микроорганиз­мов, выделенные от больных.

6. Положительные кожно-аллергические реакции у больных с аллергенами, приготовленными из условно-патогенных мик­роорганизмов.

7. В случае внутрибольничных (нозокомиальных) инфек­ций - выделение идентичных культур микроорганизмов от группы больных.

8. Совпадение данных лабораторного определения чувстви­тельности микроорганизмов к антибиотикам с эффективнос­тью антимикробной терапии в клинических условиях, под­тверждаемое улучшением состояния больного и уменьшением количества или элиминацией соответствующих микроорганиз­мов.

9. Условно-патогенные микроорганизмы (синоним: оппор­тунистические) представляют собой большую группу микроор­ганизмов, занимающих различное систематическое положение. Они встречаются среди аэробных и анаэробных бактерий, гри­бов, простейших. В клинической микробиологии наиболее час­то встречаются условно-патогенные микроорганизмы, относя­щиеся к родам Staphylococcus, Streptococcus, Escherichia, Klebsiel­la, Proteus, Entewbacter, Citrobacter, Serratia, Pseudomonas, Haemo­philus, Bacteroides, Veillonella, Vibrio, Peptococcus, Peptostreptococ-cus, Mycobacterium, Mycoplasma, Candida и др.

■ ОФОРМЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ЛАБОРАТОРНЫХ МИКРО­БИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Результаты лабораторных исследований оформляют на спе­циальных бланках, которые передают лечащему врачу.

1. В ответе прежде всего указывают наличие патогенных, а также условно-патогенных микроорганизмов, обнаруженных при микробиологическом исследовании. Сообщают также дан­ные лабораторного определения чувствительности микроорга­низмов к антибиотикам.

2. При обнаружении микробных ассоциаций перечисляют все микроорганизмы, указывают доминирующие виды и коли­чественные микробиологические показатели.

3. В соответствии с правилами международной номенкла­туры в ответах приводят видовые названия микроорганиз­мов, например: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa и т.д.

4. С целью ускорения лабораторных исследований в ряде случаев при выделении условно-патогенных микроорганизмов вполне допустимо в ответе ограничиться указанием только родовой принадлежности обнаруженных микроорганизмов, на­пример Proteus sp., Candida sp. и т.д.

Аэробные бактерии Грамположительные бактерии

Chryseobacterium indologenes Chryseobacterium meningosepticum Enterococcus faecalis и другие виды Enterococcus Erysipelothrix rhusiopathiae Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis Staphylococcus saprophiticus и другие виды Staphylococcus Streptococcus pyogenes Streptococcus agalactiae

Грамотрицательные бактерии

Burkholderia cepacia Citrobacter koseri Edwardsiella tarda Eikenella corrodens Enterobacter spp. Escherichia coli Haemophilus influenzae Klebsiella spp. Listeria monocytogenes Moraxella catarrhalis Proteus vulgaris Proteus mirabilis Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas putida Pseudomonas fluorescens Salmonella enterica

подвид enterica биовар typhimurium Serratia spp. Spirillum minus Streptobacillus moniliformis Vibrio vulnificus

Анаэробные бактерии

Неспорообразующие грамотрица­тельные анаэробы

Bacteroides fragilis

и другие виды рода Bacteroides

Prevotella melaninogenica

и другие виды рода Prevotella

Porphiromonas spp.

Fusobacterium spp.

Veilonella spp.

Неспорообразующие грамположи­тельные анаэробы

Peptostreptococcus spp. Propionibacterium acnes

Спорообразующие грамположи­тельные анаэробы

Clostridium perfringens Clostridium novyi Clostridium septicum Clostridium histolyticum Clostridium ramosum Clostridium sporogenes Clostridium tetani

Бактерии, перечисленные выше, вызывают гнойно-воспали­тельные процессы различной локализации, в том числе анги­ны, фурункулы, циститы и пиелиты, плевриты, перикардиты, сепсис и др. Многие из этих возбудителей встречаются в нор­мальной микрофлоре человека и проявляют свою патогенность только при нарушении нормальной экологии.

Стафилококки, стрептококки, протей, эшерихии и анаэроб­ные бактерии нередко вызывают смешанную инфекцию как в разнообразных сочетаниях между собой, так и с другими мик­роорганизмами - вирусами, грибами.

Тема 12.1. АЭРОБНЫЕ БАКТЕРИИ -ВОЗБУДИТЕЛИ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И РАНЕВЫХ ИНФЕКЦИЙ

▲ Программа

1. Биологические свойства возбудителей гнойно-воспа­лительной и раневой инфекции, их патогенность, эко­логия, особенности инфекции и эпидемиология вы­зываемых заболеваний.

2. Микробиологическая диагностика.

3. Диагностические препараты, профилактические и ле­чебные препараты.

А Демонстрация

1. Рост а- и р-гемолитических стрептококков на кровя­ном агаре.

2. Рост и образование пигмента P.aeruginosa на агаре.

3. Диагностические и лечебно-профилактические пре­параты.

ЗАНЯТИЕ 1

▲ Задание студентам

1. Микроскопировать и зарисовать мазки из чистых куль­тур возбудителей гнойных инфекций: S.aureus, S.pyo­genes, P.aeruginosa, E.coli, P.vulgaris. Окраска по методу Грама.

2. Микроскопировать и зарисовать мазки из гноя, содер­жащие возбудителей: стафилококков, стрептококков. Окраска по методу Грама.

3. Ознакомиться с питательными средами, применяемы­ми при микробиологической диагностике гнойных и раневых инфекций. Указать назначение отдельных пи­тательных сред.

4. Микробиологическое исследование при раневых и гнойных инфекциях:

а) указать материал, подлежащий исследованию;

б) микроскопический метод: микроскопировать мазок
из гноя, окраска по методу Грама. Сделать вывод;

в) наметить план дальнейшего исследования.

ЗАНЯТИЕ 2

Задание студентам

1. Микробиологическое исследование гноя:

а) учесть результат посева гноя на кровяной агар в
чашке Петри, описать подозрительные колонии,
отметить наличие гемолиза, составить план даль­
нейшего исследования;

б) учесть результаты определения лецитиназы и плаз-
мокоагулазы у выделенной культуры стафилококка.
Сделать вывод;

в) учесть результаты определения чувствительности
культуры стафилококка к антибиотикам. Сделать
вывод.

2. Микробиологическое исследование мочи. Определить количество бактерий в 1 мл мочи по результатам ме­тода секторных посевов. Дать заключение.

3. Серодиагностика ревматизма. Ознакомиться с описа­нием стрептолизиновой реакции. Внести в протокол результаты определения анти-О-стрептолизина в сы­воротке крови больного. Сделать вывод.

4. Дать краткую характеристику демонстрируемым анти­микробным, диагностическим и лечебно-профилакти­ческим препаратам.

Методические указания

Материал для исследования: раневое отделяемое, гной, экс­судат, моча, мазки со слизистых оболочек (носоглотки, зева и др.), кровь при подозрении на сепсис.

Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование (схема 12.1.1). Из иссле­дуемого материала (за исключением крови) готовят мазки для первичной бактериоскопии, окрашивают по методу Грама и микроскопируют. Наличие в препаратах грамположительных кокков, располагающихся в виде гроздевидных скоплений (рис. 12.1.1; на вклейке), позволяет поставить предварительный диагноз стафилококковой инфекции. Следует иметь в виду, что в патологическом материале стрептококки редко образуют ти­пичные скопления, чаще располагаются поодиночке или не­большими группами по 2-3 бактерии.

Бактериологическое исследование. Испытуемый материал засе­вают петлей на чашки с кровяным и желточно-солевым агаром

Рис. 1.4. Культура дрожжей Sac--charomyces cerevisiae при раз­ных методах микроскопии К с. 14. а - микроскопия мазка, окрашен­ного метиленовым синим; б - тем-нопольная микроскопия; в - фазо-во-контрастная микроскопия- г - люминесцентная микроскопия. Ок­раска корифосфином.

Рис.2.2.1. Смесь стафилококков и кишечных палочек. К с. 23. Окраска по методу Грама.

Рис.3.2.1. "Пестрый ряд". К с. 46.

а - ферментация углевода до кислоты и газа; б - отсутствие ферментации;

в - образование индола; г - образование сероводорода.

Рис.6.2. Постановка опыта специфической трансдукции (схема).Я" с. 26

пп™Ь Г i dga " ; б ~ реципиент E - coli 1ас "; в - Рост колоний реципиентного „» рп Т^- ВДо; г *" ^Раженная транслирующим фагом X dgal культура b.coli lac ; д - рост колоний трансдуктантов (красного цвета), несу­щих ген gal, на среде Эндо.

Рис.6.1. Постановка опыта трансформации. К с. 68. контает С пе?™г5 НК " в ™ еленно? из B.subtilis; б - реципиент B.subtilis; в -

селенной с^Л ЫХ ба,СГерИЙ С ДНК; Г ~ рост колоний Рекомбинантов на штамма н L?™ со й С1 Р ептоми «ином; д - отсутствие роста реципиентного 1мма на селективной среде со стрептомицином; е - рост колоний реципиент­ного штамма на среде без стрептомицина.

Рис.6.3. Постановка опыта по конъюгации. К с. 70. а - рост колоний бактерий донора на минимальной среде без стрептомицина; б - рост колоний рекомбинантов на селективной среде со стрептомицином без лейцина; в - рост колоний бактерий реципиентов на полной среде со стрептомицином и лейцином; г - отсутствие роста бактерий донора на среде со стрептомицином; д - донор-культура E.coli F , lei , su 5 ; е - контакт между бактериями донора и реципиента; ж - реципиент-культура E.coli F", lei", st/; з - отсутствие роста бактерий реципиента на селективной среде со стрептомицином без лейцина.

Рис. 12.1.1. Staphylococcus aureus и Streptococcus pyogenes в гное. Окраска по методу Грама. К с. 160.

Рис. 12.2.1. Clostridium perfringens в отечной жидкости. К с. 174.

Рис.19.1.1. Тельца Бабеша -Нег-ри в нейронах гиппокампа. Срез головного мозга человека. К с. 305. Окраска по методу Романовского - Гимзы.

(ЖСА) для получения изолированных колоний. Посевы инку­бируют при 37 °С в течение суток. На следующий день исследуют выросшие колонии на обеих средах. На кровяном агаре отмечают наличие или отсутствие гемолиза (рис. 12.1.2; на вклейке). На ЖСА S.aureus образует золотистые круглые выпуклые непрозрач­ные колонии. Вокруг колоний стафилококков, обладающих ле-цитиназной активностью, образуются зоны помутнения с перла­мутровым оттенком. Для окончательного установления вида ста­филококка 2-3 колонии пересевают в пробирки со скошенным питательным агаром для получения чистых культур с последую­щим определением их дифференциальных признаков (табл. 12.1.1).

Таблица 12.1.1. Дифференциальные признаки стафилококков

Вид

S.aureus

S.sapro-phyticus

S.epider-midis

Образование:

плазмокоагулазы + - -

лецитиназы + - -

альфа-токсина + - -

Ферментация:

глюкозы + + -

маннита в анаэробных условиях + - +

Чувствительность к новобиоцину S S R

Условные обозначения:(+) - наличие признака; (-) - отсутст­вие признака; S - чувствительный; R - резистентный.

Для постановки реакции на плазмокоагулазу плазму крови, разведенную в 2 раза, разливают по 0,4 мл в пробирки, вносят туда по одной петле каждой исследуемой культуры стафило­кокка и помещают в термостат при 37 °С. Через 2, 4 и 24 ч отмечают результаты опыта. При наличии плазмокоагулазы образуется сгусток. В некоторых случаях наряду с плазмокоагу-лазой и лецитиназой определяют фибринолизин, гиалуронидазу, ДНКазу.

Для установления источника внутрибольничной инфекции выделяют чистые культуры стафилококка от больных и бакте­рионосителей, после чего проводят их фаготипирование с по­мощью набора типовых бактериофагов. Фаги разводят до тит­ра, указанного на этикетке. Каждую из исследуемых культур засевают на питательный агар в чашку Петри газоном, высу­шивают, а затем петлей каплю соответствующего фага наносят на квадраты (по числу фагов, входящих в набор), предвари­тельно размеченные карандашом на дне чашки Петри. Посевы инкубируют при 37 "С. Результаты оценивают на следующий день по наличию лизиса культуры (см. рис. 5.3.2).

Определение чувствительности стафилококка к антибиоти­кам - см. тему 7.2.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохими­ческие и молекулярно-биологические исследования.

Иммунохимические исследования. Основаны на об­наружении антигенов (токсинов и ферментов) возбудителя в материале от больного с помощью чувствительных серологи­ческих реакций.

Биохимические и молекулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих моле­кул можно поставить предварительный диагноз.

Микробиологическая диагностика стрептококковых инфек­ций (схема 12.1.2)

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. Мазки для первичной бактериоскопии готовят из патологического материала (за ис­ключением крови), окрашивают по методу Грама и микроско-пируют. При положительном результате обнаруживают цепоч­ки грамположительных кокков (см. рис. 12.1.1). Следует иметь в виду, что в патологическом материале стрептококки редко образуют типичные скопления, чаще располагаются поодиноч­ке или небольшими группами по 2-3 бактерии.

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал за­севают на кровяной агар в чашку Петри. После инкубации при 37 "С в течение 24 ч отмечают характер колоний и наличие вокруг них зон гемолиза. Из части материала, взятого из ко­лоний, готовят мазок, окрашивают по методу Грама и микро-скопируют. Для получения чистой культуры 1-3 подозритель­ные колонии пересевают в пробирки со скошенным кровяным агаром и сахарным бульоном. На кровяном агаре Streptococcus pyogenes образует мелкие, величиной с булавочную головку, мутноватые круглые колонии. В бульоне стрептококк в отличие от стафилококка дает придонно-пристеночный рост в виде хлопьев или зерен, оставляя среду прозрачной.

По характеру гемолиза на кровяном агаре стрептококки делятся на три группы: 1) негемолитические; 2) aj-гемолити­ческие, или зеленящие, образующие зеленоватую зону частич­ного гемолиза; 3) р-гемолитические, образующие вокруг коло­нии полностью прозрачную зону гемолиза.

Заключительным этапом бактериологического исследования является идентификация выделенной культуры по антигенным свойствам (табл. 12.1.2). Серогруппу стрептококков определяют в реакции преципитации с экстрактом из исследуемой культу­ры (полисахаридным преципитиногеном С) и группоспецифи-

ческими сыворотками (обычно 4 наиболее распространенные серогруппы - А, В, С и D). Развернутое серологическое иссле­дование и типирование стрептококков проводят главным об­разом для эпидемиологического обследования.

Таблица 12.1.2. Дифференциальные признаки стрептококков

Вид	Рост при	Рост на средах, содержащих	желчь (40%)
	10"С	45 °С	метиленовый синий (0,1 %)	хлорид натрия (6,5 %)

Инструкция была разработана для стоматологической поликлиники, но вполне подойдет и для любого другого медицинского учреждения после небольшой корректировки.

1. ОБЩИЕ ТРЕБОВАНИЯ ОХРАНЫ ТРУДА

1.1. К работе допускаются лица, прошедшие предварительный (при поступлении на работу), периодический медицинский осмотр, иммунизацию против вирусного гепатита В, с записью в личной медицинской книжке, вводный инструктаж по охране труда.
На рабочем месте, перед началом работы, и в дальнейшем, 1 раз в 3 месяца, работник проходит инструктаж по охране труда и правилам пользования аптечкой «Анти-СПИД» в аварийных ситуациях, в соответствии с функциональными обязанностями.
1.2. Основной принцип эпидемиологической предосторожности: любой пациент рассматривается как потенциальный источник инфекции.

2. ТРЕБОВАНИЯ ОХРАНЫ ТРУДА ПЕРЕД НАЧАЛОМ РАБОТЫ

2.1. Убедиться в наличии аварийной аптечки «Анти-СПИД»:

• 70% спирт;
• 5% спиртовой раствор йода;
• перевязочный материал;
• бактерицидный пластырь;
• глазные пипетки 2 шт.;
• стерильные ватные шарики и марлевые тампоны.

2.2. Аптечка должна храниться в легко доступном месте в кабинете приема пациентов.
2.3. Работать в средствах индивидуальной защиты, отвечающих санитарно-гигиеническим требованиям: медицинских халатах (костюмах), шапочках, сменной обуви, а при угрозе разбрызгивания крови или другого биоматериала — в масках, защитных очках или экранах.
2.4. Смену одежды в подразделениях хирургического профиля осуществлять ежедневно и по мере загрязнения, терапевтического профиля – 2 раза в неделю и по мере загрязнения. Сменная обувь персонала, работающего в помещениях с асептическим режимом, должна быть из нетканого материала, доступного для дезинфекции.
2.5. Все инвазивные диагностические и лечебные манипуляции проводить в перчатках. Перчатки используются во всех случаях, когда возможен контакт со слизистыми оболочками, поврежденной кожей, с кровью или другими биологическими субстратами, потенциально или явно контаминированными микроорганизмами. Не допускается использование одной и той же пары перчаток при контакте с двумя и более пациентами, при переходе от одного пациента к другому или от контаминированного микроорганизмами участка тела к чистому. После снятия перчаток проводят гигиеническую обработку рук.
2.6. Медицинские работники, имеющие поражения кожи, отстраняется от работы и направляется на обследование и лечение. При наличии на руках микротравм, царапин, ссадин необходимо заклеить поврежденные места лейкопластырем.

3. ТРЕБОВАНИЯ ОХРАНЫ ТРУДА ВО ВРЕМЯ РАБОТЫ

3.1. Необходимо проявлять максимальную осторожность при выполнении манипуляций с колющими и режущими инструментами (иглы, боры, диски и др.); открывая флаконы, ампулы следует избегать проколов и разрывов перчаток, порезов рук.
3.2. Разборку и мойку медицинского инструментария, приборов и аппаратов, соприкасавшихся с кровью, слюной пациентов нужно проводить только в перчатках после предварительной дезинфекции инструментов, приборов, аппаратов.
3.3. Запрещается надевание колпачков на использованные иглы. Острые предметы должны сбрасываться в непрокалываемые контейнеры с дезраствором.
После проведения инъекции (манипуляции) медицинский работник, не накрывая иглу колпачком, набирает в шприц при помощи поршня дезраствор из емкости «для дезинфекции шприцев», затем отсоединяет иглу от шприца с помощью иглосъемника непрокалываемого контейнера. После отсоединения иглы корпус шприца с поршнем помещают в промаркированную емкость с дез. раствором «для дезинфекции шприцев». Выпускать дез. раствор из корпуса шприца с помощью поршня можно только после соответствующей экспозиции.
3.4. Выполнять манипуляции ВИЧ-позитивному пациенту необходимо в присутствии второго специалиста, который может в случае разрыва перчаток или пореза продолжить ее выполнение.
3.6. Использовать двойные перчатки (если это возможно при операции), поскольку это значительно сокращает количество крови, поступающей внутрь при повреждении перчаток.
3.7. Передавать все острые инструменты через лоток, а не из рук в руки, исключить использование пальцев для направления иглы, изменить хирургические приемы с переходом на использование иглодержателей.
3.8. Заполнение медицинской документации должно вестись на чистом столе.
3.9. В ходе проведения манипуляций пациенту персонал не должен вести записи, прикасаться к телефонной трубке и т.п.
3.10. Запрещается принимать пищу, напитки, курить и пользоваться косметикой на рабочем месте.
3.11. Не допускается выход сотрудников в медицинской одежде и обуви за пределы поликлиники.

4. ТРЕБОВАНИЯ ОХРАНЫ ТРУДА В АВАРИЙНЫХ СИТУАЦИЯХ

4.1. В случае порезов и уколов немедленно снять перчатки, вымыть руки с мылом под проточной водой, обработать руки 70% спиртом, смазать ранку 5% спиртовым раствором йода.
4.2. При попадании крови или других биологических жидкостей на кожные покровы это место обрабатывают 70% спиртом, обмывают водой с мылом и повторно обрабатывают 70% спиртом.
4.3. При попадании крови и других биологических жидкостей пациента на слизистую глаз, носа и рта: ротовую полость промыть большим количеством воды и прополоскать 70% раствором этилового спирта, слизистую оболочку носа и глаза обильно промывают водой (не тереть).
4.4. При попадании крови и других биологических жидкостей пациента на халат, одежду: снять рабочую одежду и погрузить в дезинфицирующий раствор. Кожа рук и других участков тела под местом загрязненной одежды протирается 70%-ным спиртом, затем промывается с мылом и повторно протирается спиртом; загрязненная обувь двукратно протирается ветошью, смоченной в растворе одного из дезинфицирующих средств.
4.5. О каждом аварийном случае необходимо немедленно сообщить руководителю подразделения, его заместителю или вышестоящему руководителю.
4.6. Травма, полученная медработником, регистрируется в «Акте о несчастном случае на производстве» (3 экз.) и Журнале регистрации несчастных случаев на производстве. В составлении Акта принимает участие комиссия из 3-х человек: зав. отделением, старшая медицинская сестра, инженер по охране труда.
4.7. Провести комплекс мероприятий по предотвращению заражения ВИЧ-инфекцией согласно «Алгоритма действий медицинского персонала при травмах», утвержденного главным врачом Учреждения: обследование на ВИЧ и вирусные гепатиты В и С пациента – потенциального источника заражения и медицинского работника, проведение постконтактной профилактики заражения ВИЧ антиретровирусными препаратами, диспансерное наблюдение пострадавшего медицинского работника в СПИД-центре.

5. ТРЕБОВАНИЯ ОХРАНЫ ТРУДА ПО ОКОНЧАНИИ РАБОТЫ

5.1. Дезинфекцию поверхностей предметов, находящихся в зоне лечения (столик для инструментов, кнопки управления, клавиатура, воздушный пистолет, светильник, плевательница, подголовник и подлокотники стоматологического кресла) проводят после каждого пациента дезинфицирующими средствами широкого спектра антимикробного действия методом двукратного протирания, каждый раз новой ветошью, в случае загрязнения любых поверхностей кровью — дезинфекция проводится немедленно.